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从IMGT数据库下载免疫组库相关fasta序列

生信技能树 生信技能树 2022-06-07
前面我在生信技能树的推文教程:通过IMGT数据库认知免疫组库 提到了它是目前免疫组库相关fasta序列整理的最齐全的。(因为被黑粉举报,所以我们公众号时隔半个月才能继续发原创,让大家久等了)
真的是搞不明白,我辛辛苦苦写教程,为什么黑粉一定要无理取闹的举报!!!委屈
BCR有IGH,IGK,IGL这3类,而TCR有TRA,TRB,TRD,TRG,它们各自都有V,D(可选),J,C基因,这么多基因的序列都是可以直接下载的。
都是在:http://www.imgt.org/vquest/refseqh.html#VQUEST
首先是多个物种的BCR的IGH,IGK,IGL这3类的V,D(可选),J基因:

BCR的IGH,IGK,IGL
然后是多个物种的TCR的TRA,TRB,TRD,TRG的V,D(可选),J基因:

TCR的TRA,TRB,TRD,TRG

人类IGH的fasta文件下载

首先IGH是BCR的一种,有V,D,J基因,其fasta文件如下:
mkdir ~/biosoft/igblast/imgt 
cd  ~/biosoft/igblast/imgt 
wget http://www.imgt.org/download/V-QUEST/IMGT_V-QUEST_reference_directory/Homo_sapiens/IG/IGHV.fasta
wget http://www.imgt.org/download/V-QUEST/IMGT_V-QUEST_reference_directory/Homo_sapiens/IG/IGHD.fasta
wget http://www.imgt.org/download/V-QUEST/IMGT_V-QUEST_reference_directory/Homo_sapiens/IG/IGHJ.fasta
简单统计是:
IGHD.fasta:44,37
IGHJ.fasta:13,6
IGHV.fasta:402,106
http://www.imgt.org/IMGTrepertoire/LocusGenes/genetable/human/geneNumber.html
数量似乎有点对不上。


具体看
>J00256|IGHJ1*01|Homo sapiens|F|J-REGION|723..774|52 nt|1| | | | |52+0=52| | |
>J00256|
IGHJ2*01|Homo sapiens|F|J-REGION|932..984|53 nt|2| | | | |53+0=53| | |
>J00256|IGHJ3*01|Homo sapiens|F|J-REGION|1537..1586|50 nt|2| | | | |50+0=50| | |
>X86355|
IGHJ3*02|Homo sapiens|F|J-REGION|1107..1156|50 nt|2| | | | |50+0=50| | |
>J00256|IGHJ4*01|Homo sapiens|F|J-REGION|1912..1959|48 nt|3| | | | |48+0=48| | |
>X86355|
IGHJ4*02|Homo sapiens|F|J-REGION|1480..1527|48 nt|3| | | | |48+0=48| | |
>M25625|IGHJ4*03|Homo sapiens|F|J-REGION|446..493|48 nt|3| | | | |48+0=48| | |
>J00256|
IGHJ5*01|Homo sapiens|F|J-REGION|2354..2404|51 nt|3| | | | |51+0=51| | |
>X86355|IGHJ5*02|Homo sapiens|F|J-REGION|1878..1928|51 nt|3| | | | |51+0=51| | |
>J00256|
IGHJ6*01|Homo sapiens|F|J-REGION|2947..3009|63 nt|3| | | | |63+0=63| | |
>X86355|IGHJ6*02|Homo sapiens|F|J-REGION|2482..2543|62 nt|3| | | | |62+0=62|partial in 3'| |
>X86356|
IGHJ6*03|Homo sapiens|F|J-REGION|2482..2543|62 nt|3| | | | |62+0=62|partial in 3'| |
>AJ879487|IGHJ6*04|Homo sapiens|F|J-REGION|39..101|63 nt|3| | | | |63+0=63| | |

进行多序列比对,查看它们的远近关系

比如看IGHV,就是123-129个基因,可以分成3大类和7小类:
  • clan I: IGHV1, IGHV5 and IGHV7 subgroup genes
  • clan II: IGHV2, IGHV4 and IGHV6 subgroup genes
  • clan III: IGHV3 subgroup genes
这些基因都拥挤在狭小的染色体片段上面:
All the IGHV genes are in a fully sequenced contig which comprises the following accession numbers:
  • AB019437 (200000 bp): IGHV(III)-82 to IGHV(II)-60-1
  • AB019438 (200000 bp): IGHV3-60 to IGHV4(II)-40-1
  • AB019439 (200000 bp): IGHV7-40 to IGHV3-21
  • AB019440 (200000 bp): IGHV(II)-20-1 to IGHV2-5
  • AB019441 (157090 bp): IGHV4-4 to IGHV6-1
因为IGHV序列太多,比对起来耗费时间,我这里就举例IGHJ,如下:

IGHV序列比对结果
可以看到,它们不同序列的差异很微弱,都集中在开头的几个碱基,其中IGHJ6跟另外的5类差异最大。
大家觉得该如何可视化上面的结果呢?
library(Biostrings) 
library(msa)
library(ggtree)
library(seqinr) 
mySequences <- readDNAStringSet('IGHJ.fasta')
mySequences
myAlignment <- msa(mySequences)
欢迎邮件交流你的可视化想法,发到我的邮箱 jmzeng1314@163.com
比如我这里可以使用msaR包:
library(msaR) 
msaR(AAStringSet(as.character(myAlignment)))
看起来还挺有感觉的哦!


比如ggtree可以读取多种格式(包括newick,nexus,NHX,jplace和phylip)的系统发育树,并结合不同类型的相关数据进行注释分析。
这些bioconductor包的使用,我们在R语言公益课的钉钉群有视频讲解,欢迎大家加入学习,详见:R语言公益课程之bioconductor
自行加入看录播咯,虽然bioconductor已经结束,但是今晚(2020-05-19,周二)八点还有绘图的直播课程哈。

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